Según la Organización Mundial de la Salud (OMS) ​(1)​, “ningún país, establecimiento hospitalario o centro de atención médica puede garantizar la seguridad de sus pacientes si no salvaguarda la protección de su personal sanitario”. Esto se debe a que las diversas actividades desempeñadas por los profesionales de la salud los exponen a una amplia gama de riesgos. A pesar de la relevancia de las normas de bioseguridad, se ha detectado que, aunque se poseen los conocimientos sobre dichos parámetros, en ocasiones el personal de las clínicas no le da relevancia y se aprecia en el bajo porcentaje de implementación por parte de los expertos en este campo del conocimiento médico ​(2)​. Este trabajo tiene como objetivo analizar los conocimientos y prácticas en bioseguridad de los estudiantes, profesores y auxiliares en las clínicas odontológicas de las ciudades de Bogotá, Pasto y Villavicencio de la Universidad Cooperativa de Colombia sobre los diferentes grupos involucrados en el área de odontología, utilizando un tipo de estudio correlacional de corte transversal, aplicando una encuesta previamente validada, la cual se compartió en formato digital luego de lograr el consentimiento informado de los participantes, teniendo en cuenta los criterios de inclusión de la muestra la cual fue a conveniencia. Con base en el ANOVA, los resultados obtenidos ofrecen perspectivas sobre los conocimientos y prácticas en bioseguridad, con esta información se propone desarrollar estrategias de intervención y formación que mejoren efectivamente la adherencia a las prácticas en bioseguridad con el fin de establecer un entorno clínico más seguro así minimizar los riesgos garantizando, además, la protección de la salud del personal clínico involucrado en la atención odontológica.