El manejo inadecuado de los suelos en regiones cultivables ha intensificado los problemas de fertilidad en los mismos, debido al uso indiscriminado de fertilizantes químicos. La posibilidad de usar técnicas basadas en la manipulación de microorganismos como biofertilizantes es una alternativa que cada día cobra más interés. Dentro de la gran variedad de microorganismos que han sido descritos como Fijadores Biológicos de Nitrógeno son de gran interés las bacterias del tipo Actinomicetos, ya que, desempeñan un papel importante en la producción de metabolitos secundarios, degradación de material orgánico y promoción del crecimiento vegetal. Considerando el gran impacto de los Actinomicetos en el suelo y al contar con un área de conservación natural en la Universidad Tecnológica de Pereira como lo es su Jardín Botánico (JBUTP), surgió el interés de realizar el aislamiento e identificación en génerode Actinomicetos Fijadores de Nitrógeno. El Aislamiento realizado en Medio selectivo Ashby permitió la obtención de 24 Actinomicetosque poseen potencial para fijar Nitrógeno Atmosférico. La identificación en género se realizó a través de comparación morfológica de sus estructuras miceliares con las estructuras referenciadas para cada género de Actinomiceto en el Manual Taxonómico de Bergey, evidenciándose 13 cepas del género Streptomyces y 11 del género Nocardia. Para confirmar los géneros se emplearon pruebas bioquímicas (catalasa, oxidasa, urea, gelatina, citratos, lactosa, nitratos), resultando en general una similitud de más del 70% con las características bioquímicas propias de estos géneros las cuales sonreportadas en el libro TheProcaryotes A Handbook of bacteria.