Las enzimas β-galactosidasa, β-glucuronidasa y β-hexosaminidasa, son proteínas que cumplen una función hidrolítica para la degradación de macromoléculas como glicosoaminoglicanos, gangliósidos, entre otros. La disminución de estas enzimas conlleva al acúmulo de estas moléculas no degradadas, indicando una baja actividad enzimática y del mismo modo, podría evidenciar una posible enfermedad de depósito lisosomal (LSD, por sus siglas en inglés). En este estudio, se optimizaron protocolos de cuantificación fluorimétrica para evaluar la actividad enzimática en fibroblastos wild type. Posteriormente, se replicaron dichos ensayos en leucocitos, monocitos y macrófagos de individuos sanos. Los resultados demostraron que los métodos seleccionados son eficientes para la medición de actividades enzimáticas de hidrolasas lisosomales, mostrando diferencias significativas entre las fluorescencias de las muestras y sus blancos de reacción, y obteniendo valores altos de actividad enzimática. Adicionalmente, se evidencia que los macrófagos y los fibroblastos son modelos idóneos para estudios de LSD, ya que cuentan con actividades cuantificables de enzimas hidrolíticas y aportan una base para investigaciones futuras sobre la función lisosomal y degradación de macromoléculas en diferentes tipos celulares.