spa:Los reptiles son vertebrados de distribución mundial, con una alta diversidad en el territorio colombiano representada principalmente por serpientes y lagartos. Históricamente, el dimorfismo sexual de los reptiles se ha basado en la evaluación de características anatómicas secundarias y mediante el uso de técnicas como sondeo cloacal y eversión manual o hidrostática de hemipenes. Por otra parte, los reportes dietarios y reproductivos de los reptiles se obtienen por observaciones directas o disecciones de especímenes en colecciones biológicas. La radiología es una herramienta no invasiva, de bajo costo, con una alta sensibilidad diagnóstica y que permite una evaluación ulterior de la imagen obtenida que, para reptiles, ha sido bien estandarizada y puede aportar información anatómica y de historia natural. Basados en lo anterior, esta investigación empleó radiografías simples de 242 especímenes de 63 taxones depositados en el Museo de Historia Natural de la Universidad de Caldas (MHN-UCa), Colombia. Los rayos-X obtuvieron una sensibilidad diagnóstica destacada, generando aportes nuevos y de relevancia como información biológica para los reptiles del Neotrópico. Entre los resultados se destacan los conteos de vertebras, la visualización de hemipenes mineralizados que son claves para análisis de dimorfismo y sexaje de los especímenes preservados, evidencia de la presencia, morfología y cantidad de huevos en 8 especies de reptiles y, la identificación de presas como roedores, anuros, lagartos, aves y otras serpientes. Finalmente, se encontró colmillos propios contenidos en los tractos digestivos de 4 especies de serpientes.