El tratamiento de pacientes con Leucemia Linfoide Aguda (ALL) ha logrado unos porcentajes elevados y significativos de remisión completa. Sin embargo, un grupo reducido de pacientes recae, debido en parte a la presencia de células leucémicas residuales que escapan a la terapia. Las células madre mesenquimales (MSC) son importantes no sólo como soporte funcional para las células madre hematopoyéticas (HSC) sino también como un factor que promueve la supervivencia de las células leucémicas y el desarrollo de la enfermedad. La interacción entre las MSC y las células leucémicas desencadena la activación de diferentes vías de señalización, lo que lleva a la remodelación del denominado “nicho leucémico” y la supervivencia de las células leucémicas. La proteína quinasa C (PKC) es un factor importante que media el soporte de las MSC. Aquí se estudió el papel de PKC en un modelo in vitro de nicho leucémico, utilizando MSC de individuos sanos y células leucémicas de pacientes pediátricos con ALL-B (n = 22). Se empleó el péptido quimérico HKPS, como estrategia para inhibir la PKC tanto en las células ALL-B como en las MSC. En primer lugar, se determinó mediante ensayos con MTT una reducción en la viabilidad de las células ALL-B después de 2 h de tratamiento con 40 μM de HKPS; 7 de 22 muestras mostraron una mayor susceptibilidad al tratamiento con HKPS (casi un 50% de inhibición); 7 pacientes no fueron susceptibles a HKPS mientras que 8 pacientes mostraron una respuesta intermedia. En los co-cultivos se determinó que el pretratamiento de las MSC con HKPS no afectó significativamente la viabilidad de las MSC, pero abolió el efecto protector de las MSC en ALL-B. Se estableció que las interacciones célula a célula son esenciales para la viabilidad de las células de ALL-B. El tratamiento con Enzastaurina, un inhibidor comercial de PKC, redujo la adhesión celular; sin embargo, esta función se vio más afectada después del tratamiento con HKPS. Se encontró que ICAM-1 y VLA-5, moléculas que se sobreexpresaron en las MSC después del co-cultivo, fueron reguladas negativamente por HKPS, lo que explica la pérdida de adhesión de las células ALL-B y la pérdida de viabilidad. Además, se observaron cambios en la activación de las vías de señalización de FAK y AKT cuando las MSC fueron pretratadas con HKPS. Curiosamente, HKPS indujo la regulación negativa de las vías ERK y NF-κB que se activaron en respuesta a la quimioterapia. La inhibición de PKC en el soporte de MSC aumentó la susceptibilidad de las células leucémicas al tratamiento con Dexametasona, Vincristina y Metotrexate. HKPS también inhibió la actividad de aldehído deshidrogenasa en las MSC e indirectamente indujo un aumento en la actividad de los principales transportadores de fármacos de la familia ABC. Estos resultados demuestran la importancia de la comunicación intercelular en el nicho leucémico y el papel de la PKC en el soporte leucémico. El uso del péptido quimérico HKPS podría ser una nueva estrategia para aumentar la susceptibilidad a la terapia al afectar directamente la viabilidad de las células ALL-B y alterar las señales pro-supervivencia que a estas les confieren las MSC.