ImpactU Versión 3.11.2 Última actualización: Interfaz de Usuario: 16/10/2025 Base de Datos: 29/08/2025 Hecho en Colombia
Sobreexpresión heteróloga de la lipasa A de Bacillus subtilis (BSLA) en Escherichia coli BL21 (DE3): transesterificación enzimática mediante el uso de extractos crudos, aceite de palma y metanol
La sintesis quimica de biodiesel genera residuos contaminantes; una solucion biotecnologica a este problema es la transesterificacion enzimatica usando lipasas. No obstante, para Colombia, el escalado a nivel industrial resulta inviable dados los costos de adquisicion de lipasas importadas (U.S.$ 1000-2000/kg). Una solucion potencial es producir localmente las lipasas en hospederos bacterianos. En este trabajo, se demostro la capacidad de la lipasa A de Bacillus subtilis (BSLA) para catalizar la transesterificacion entre el aceite de palma y el metanol. Previamente, se evaluo in silico la estabilidad estructural de BSLA (codigo PDB 2qxu) en una mezcla de metanol y aceite crudo de palma africana. Posteriormente, se clono el gen LipA en el vector pET22b y se indujo la sobreexpresion heterologa en celulas de Escherichia coli transformadas, hasta alcanzar los maximos niveles de expresion. La produccion recombinante de LipA se monitoreo mediante SDS-PAGE y por la actividad hidrolitica sobre p -Nitrofenil butirato. Se realizaron ensayos de transesterificacion usando extractos crudos de E. coli inducida con IPTG. Los resultados revelaron que BSLA si cataliza reacciones de transesterificacion, con una tasa de produccion de 10.7% de metilesteres. Se concluyo que BSLA tiene potencial para producir biodiesel, aunque resta comparar su eficacia con las lipasas comerciales.