Las enfermedades periodontales son condiciones inflamatorias cronicas de las encias, su etiologia esta asociada con la disbiosis que ocurre ante la presencia de microorganismos periodonto patogeno y la respuesta inmune exacerbada del hospedero que tiene como resultado el desarrollo de un proceso inflamatorio que conduce al dano de los tejidos periodontales. Actualmente, el tratamiento complementario de estas enfermedades incluye el uso de antibioticos topicos o de aplicacion local. En este estudio se escogio las tetraciclinas que son antibioticos de alto espectro con actividad bactericida frente a bacterias Gram positivas y Gram negativas; sin embargo, no hay una estandarizacion establecida en cuanto a la concentracion y la forma de dilucion del medicamento lo que posiblemente afecta la efectividad antimicrobiana de los mismos. Objetivo: Se evaluo la actividad antimicrobiana de la tetraciclina HCL in vitro sobre Prevotella intermedia (ATCC®25611™) y Porphyromonas gingivalis (ATCC® 33277™) en diferentes vehiculos de dilucion y diferentes concentraciones. Materiales y metodos: Estudio experimental in vitro donde se evaluo la actividad antimicrobiana de la tetraciclina sobre Prevotella intermedia y Porphyromonas gingivalis, diluida en agua destilada, solucion salina, y lidocaina al 2% - epinefrina 1:800.000, en diferentes concentraciones (125, 250, 500 mg) y tiempos (30, 60, 120 segundos), mediante la prueba de Kelsey- maurer se evaluaron variables como concentracion de tetraciclina, tiempo y efecto antimicrobiano. El analisis estadistico de los datos se realizo aplicando medidas de tendencia central como el promedio y desviacion estandar, mediante el programa Excel. Resultados: Se concluyo que la tetraciclina HCL disuelta en anestesia lidocaina al 2% con epinefrina 1:80.000, agua destilada y solucion salina en concentraciones del antibiotico (125, 250, 500mg) y en tiempos de exposicion (30, 60, 120 segundos) presento actividad antimicrobiana sobre Prevotella intermedia y Porphyromonas gingivalis. Palabras Claves: Tetraciclina, Prevotella intermedia, Porphyromonas gingivalis, Tecnicas in vitro