Evaluar los niveles de SP, CGRP, sus receptores NK-1 y CGRP-R en el ligamento periodontal de premolares inferiores despues de la preparacion del conducto radicular utilizando los sistemas Reciproc blue®, M-Two® y Plex V®. Se obtuvieron cincuenta muestras de ligamento periodontal, provenientes de premolares inferiores extraidos por razones ortodonticas, las cuales fueron aleatoriamente distribuidas a cinco grupos: un control negativo o sin instrumentar, un control positivo preparado con limas manuales, y 3 sistemas de preparacion (Reciproc Blue®, M-Two® y Plex V®) (n= 10). Los tejidos se almacenaron a -80 °C, posteriormente se descongelaron en un bano frio y se volvieron a congelar con sus respectivos deshielos para desintegrar el tejido. Se realizaron tres ciclos de sonicacion hasta que las muestras se homogeneizaron, luego se centrifugo y se recogio el sobrenadante para la deteccion de los marcadores a estudiar. Las muestras se procesaron para la prueba ELISA utilizando el principio ELISA-sandwich. Para cada proteina analizada, se calculo la media, mediana y la desviacion estandar en cada grupo. Las pruebas ANOVA y Kruskal-Wallis, se realizaron de acuerdo con su comportamiento parametrico o no parametrico. Finalmente se exploraron diferencias entre grupos por medio de una prueba pos-hoc Tukey en normalidad o U Mann-Whitney, si no eran normales.