Los residuos industriales son recursos que generan una seguridad energetica regional, pero ellos no han sido suficientemente valorizados. En el sur de Colombia, el sector de la cana de azucar produce aproximadamente 9´000 000 T/ano de residuos, principalmente representados por hojas y cogollos. De estos residuos es posible obtener etanol y una de las etapas mas criticas es su deslignificacion. En este proceso, la remocion de lignina con el uso de extractos de enzima extracelular y mediadores, todavia no ha sido ampliamente estudiada. Por consiguiente, se desarrollo una metodologia para extraer del hongo Pleurotus ostreatus, el cual fue cultivado por fermentacion en substrato solido, un coctel de enzimas compuesto por lacasa, manganeso peroxidasa (MnP) y lignoperoxidasa (LiP). Estos extractos enzimaticos fueron probados con el uso de dos mediadores: 1) ABTS: 2,2´-azino-bis-3-etilbenzotiazolina-6-acido sulfonico y 2) vainillina, sobre dos diferentes tipos de residuos: no tratados y pretratados con ultrasonido. Como resultado se encontro que el extracto crudo de enzima estuvo compuesto por actividad lacasa (0.432 U/mL), LiP (0.116 U/mL) y MnP (0.025 U/mL). Adicionalmente, los resultados confirmaron que este extracto crudo en asocio con ABTS como mediador de lacasa, fue capaz de remover el 52.7% de la lignina de los residuos de cana de azucar pretratados con ultrasonido. Tambien es importante resaltar que estos resultados fueron muy promisorios, sobre todo si se puede usar un extracto extracelular mas concentrado.