Se produjeron las celulas de Kluyveromyces-fragiiis por fermentacion en cochada a 29°C, en un medio de cultivo previamente estandarizado por Manosalva, H., Nieto, G. (2) y se retiraron del medio de fermentacion al inicio de la fase estacionaria (14 h) para posteriormente permeabilizarlas. Se compararon dos agentes de permeabilizacion, alcohol isoamilicoy bromuro de cetiltrimetilaminio(CTAB) y se determino la actividad lactasica empleando dos sustratos, ortonitrofenil-(3Dgalactopiranosido (ONPG) y lactosa. La permeabilizacion de las celulas empleando uno u otro agente aumento la actividad 200 veces respecto a las celulas intactas. Se hicieron ensayos de inmovilizacion de Kluyveromycesfragilis, por el metodo de absorcion sobre tres carbones activados y se determino la actividad lactasica de los complejos carbon-celula, usando lactosa como sustrato. Se encontro que a mayor area superficial mayor actividad del complejo carbon-celula.