Objetivo: evaluar el recuento de Unidades Formadoras de Colonias (UFC) de Streptococcus mutans y Staphylococcus aureus de los cepillos dentales de preescolares vinculados con dos jardines infantiles del Instituto Colombiano de Bienestar Familiar de Bucaramanga. Metodologia: se realizo un estudio observacional, descriptivo de corte transversal con 24 cepillos dentales de ninos de 3 a 5 anos. Se analizaron variables sociodemograficas, las unidades formadoras de colonias de Streptococcus mutans y Staphylococcus aureus, la forma de almacenamiento del cepillo y la frecuencia del cepillado. Para el procesamiento de las muestras se utilizaron las cabezas de los cepillos que se sumergieron en solucion salina esteril para lograr el desprendimiento de los microorganismos. Seis cepillos se procesaron a los cinco dias, otros seis a los diez dias y los ultimos seis, a los quince dias. Se utilizo Agar Salivarius Mitis para el aislamiento de Streptococcus mutans y Agar Baird Parker para aislar Staphylococcus aureus que se incubaron durante 48 horas. Se calcularon frecuencias y proporciones para las variables cualitativas y medidas de tendencia central y dispersion para las cuantitativas. Se utilizo el test Chi cuadrado o Exacto de Fisher, segun fuera apropiado. Un valor de p<0,05 fue considerado como estadisticamente significativo. Se obtuvo el consentimiento informado de los dos hogares infantiles. Resultados: el promedio de edad fue 3,3 anos y 16 (66,7%) eran ninas, la mitad de los preescolares pertenecian al estrato socioeconomico 2 y la mitad al 4. El recuento de UFC de Streptococcus mutans y Staphylococcus aureus fue negativo en todas las muestras. Conclusiones: es posible que Streptococcus mutans y Staphylococcus aureus se encuentren en la boca de preescolares, pero no en la cantidad sufi ciente para realizar un recuento de unidades formadoras de colonias.