El presente estudio muestra el uso de enzimas celuloliticas de Bacillus sp en el proceso de hidrolisis enzimatica y su empleo en la produccion de etanol de segunda generacion. Se emplea el metodo de Plackett-Burman, para descartar variables que no influyen en el proceso de hidrolisis enzimatica, para asi posteriormente ajustar el modelo y utilizar el diseno de optimizacion factorial de Box-Hunter25-2 . Una vez optimizadas las condiciones de los experimentos en el proceso de hidrolisis enzimatica, se selecciono el mejor ensayo considerando el rendimiento mas alto de glucosa por 100g de bagazo, y se analizo la etapa fermentativa, obteniendo como resultado que se producira 1 litro de etanol de segunda generacion por cada 12,83kg de bagazo y 77,9 litros por cada tonelada de bagazo