La regulación de la expresión génica asociada a la producción de biopelículas en bacterias Gram negativas es mediada por Quórum Sensing (QS). Estudios previos han demostrado la degradación de señales QS de la variante lactonasa epp852 y la atenuación in vitro de infecciones producidas por Pectobacterium carotovorum, Agrobacterium tumefaciens y Pseudomonas aeruginosa PAO1. Materiales y Métodos: se investigó la inhibición de señales QS y la formación de biopelículas en bacterias Gram negativas multidrogoresistentes, empleando la lactonasa recombinante epp852. Se tamizaron cepas provenientes de muestras clínicas, previamente aisladas e identificadas con patrón de resistencia antibiótica. Se evaluó la producción de señales QS dependientes de acíl homoserina lactona (AHL) mediante el biosensor Chromobacterium violaceum. Se cuantificó la violaceína producida y se determinó la formación de biopelículas mediante la microtitulación en placa y cuantificación de cristal violeta. Las cepas que produjeron señales AHLs y formaron biopelículas se sometieron a estudios de inhibición QS con la lactonasa recombinante epp852. Resultados: se identificaron 29 aislamientos Gram negativos con fenotipos de resistencia y sensibilidad antibiótica que producen señales AHL. En el aislamiento 92, S. marcescens productora de betalactamasa, se obtuvo una inhibición del 98.12%, en la formación de la biopelícula y para el aislamiento 28, P. aeruginosa sensible se obtuvo una reducción en el índice de formación de biopelícula del 36.4%. Se observó diferencia estadísticamente significativa al comparar el tratamiento con lactonasa para P. aeruginosa (P= 0,038) y S. marcescens (P= 0,028) Conclusiones: El efecto de la atenuación de la variante epp852 en microorganismos patógenos, permite el desarrollo de nuevas estrategias biomédicas para el control de las infecciones originadas por bacterias Gram negativas multidrogo resistentes.