Introduccion: En el campo de los productos naturales, las investigaciones que procuran la purificacion e identificacion de los principios activos de las plantas junto con la determinacion de sus actividades biologicas, se consolidan como una linea relevante del desarrollo cientifico. Objetivos: Evaluar la actividad biologica de la fraccion de eter de petroleo de las semillas de Crotalaria juncea L. sobre Drosophila melanogaster , asi como identificar y caracterizar estructuralmente los principios bioactivos. Metodos: Se evaluo la bioactividad del extracto de eter de petroleo (fraccion 45-60 °C) obtenido de las semillas secas de C. juncea a partir de su ingestion por D. melanogaster . La estructura quimica del compuesto se determino mediante diferentes pruebas de resonancia magnetica nuclear (RMN). Resultados: La bioactividad del compuesto se manifiesta con la inhibicion de los estados larvarios, porque disminuye el numero de pupas en los tratamientos. La relacion dosis/respuesta permitio calcular una concentracion de inhbicion media CI 50 de 4,24 × 10 -4 M para esta bioactividad. Los resultados de diferentes pruebas de RMN, 1-D 13 C, 1-D 1 H y 2-D 1 H- 13 C HMBC, HMQC, COSY y la comparacion con la literatura permitieron definir la estructura del compuesto como estigmasterol. Conclusiones: El ensayo de la bioactividad del compuesto aislado en el extracto de polaridad baja permitio comprobar la actividad insecticida que causa la disminucion del numero de pupas en los tratamientos comparado con los controles. El analisis estructural de este compuesto permitio determinar que se trata del estigmasterol y realizar el primer informe de su aislamiento en las semillas de C. juncea . Anteriormente se pudo constatar que D. melanogaster no puede metabolizar el estigmasterol. Palabras clave: Crotalaria juncea L.; correlacion dosis/respuesta; Drosophila melanogaster ; estigmasterol; modelo biologico; relacion adulto/pupa (R A/P), CI 50 .