Klebsiella spp, en particular Klebsiella pneumoniae , es causa importante de infeccion nosocomial. Este microorganismo es con frecuencia resistente a numerosos antibioticos, incluyendo las recientes oxy-imino-cefalosporinas, mediante la produccion de b - lactamasas de espectro extendido (BLEE). Se recolectaron 32 aislamientos de K. pneumoniae , resistentes por lo menos a tres grupos diferentes de antibioticos, en cuatro hospitales de tercer nivel de complejidad de la ciudad de Medellin, con el fin de biotipificarlos, establecer su perfil de sensibilidad y determinar la produccion de b -lactamasas de espectro extendido (BLEE) y su patron de bandas plasmidicas. La identificacion bioquimica y las pruebas de sensibilidad se determinaron en el sistema Micro Scan. La produccion de BLEE se detecto por el metodo de sinergismo de doble disco, y el perfil de bandas plasmidicas se determino con el kit plasmid minipreparation de QIAgen y se observo por electroforesis. Los resultados demostraron que K. pneumoniae nosocomial es mas frecuente en salas pediatricas (48.8%, 14/32). Las pruebas de susceptibilidad mostraron que 100% de los aislamientos son resistentes a piperacilina y ampicilina y sensibles a ciprofloxacina, ofloxacina, cefotetan e imipenem. La sensibilidad para los demas antibioticos probados fue variable. El 18.8% de los aislamientos presento sensibilidad a las cefalosporinas de tercera generacion. Se identificaron nueve biotipos diferentes, aunque 81% de los 32 aislamientos pertenecieron solo a tres biotipos. Se observo alto porcentaje de aislamientos productores de BLEE (65.6%). El perfil de bandas plasmidicas mostro ocho patrones diferentes y una banda comun. Estos resultados hacen necesario incrementar politicas de control en el uso de antibioticos para limitar la presion selectiva en la flora intrahospitalaria en las instituciones estudiadas.