En este estudio se determinó la viabilidad espermática utilizando los diluyentes INRA 82 modificado (T1) y Botucrio® (T2) en la criopreservación de semen de caballos criollos colombianos. Se evaluaron los eyaculados de 5 Caballos Criollos Colombianos colectados por vagina artificial tipo Missouri, las muestras fueron sometidas a dilución 1:1 y centrifugado a 3500 rpm. Se eliminó el sobrenadante y se diluyó el botón en T1 y T2, hasta llevar el material espermático a una concentración de 150X106 y siendo empacados en pajillas de 0,5 mL. El tratamiento INRA fue sometido a una curva de enfriamiento de 80 minutos y frente al tratamiento Botucrio que fue sometido a una curva de 20 minutos, posteriormente las pajillas fueron expuestas a vapores de nitrógeno por 15 minutos y finalmente se sumergieron en nitrógeno líquido. La descongelación de las pajillas se realizó a 37 grados centígrados durante 30 segundos. La evaluación del semen en fresco se realizó por microscopia óptica: motilidad total 70±13,3, motilidad progresiva 64±15,0, vigor 3± 0. La evaluación de los tratamientos posdescongelación se realizó por CASA (motilidad total, motilidad progresiva, intensidad, elongación, velocidad de trayectoria, velocidad progresiva y velocidad curvilínea), morfología, epifluorescencia de naranja de acridina, prueba hiposmótico y prueba de termoresistencia. El análisis estadístico se hizo prueba de Kruskal Wallis y ANAVA con bloques completamente al azar, donde se encontraron diferencias estadísticamente significativas (P