Introduccion: la linea de celulas Caco-2 es la mas utilizada para la evaluacion de la permeabilidad gastrointestinal in vitro ; sin embargo, se han encontrado diversos factores que causan variaciones en los valores de permeabilidad para un mismo compuesto. Objetivo: establecer la idoneidad de cepas diferentes de celulas Caco-2 en la determinacion de la permeabilidad de farmacos. Metodos: se evaluo la morfologia de los cultivos de celulas con microscopio invertido, su velocidad de crecimiento, actividad de fosfatasa alcalina, resistencia electrica transepitelial (TEER) y permeabilidad del amarillo de lucifer, propranolol y furosemida a traves de ellas. Resultados: el seguimiento a traves de microscopio demostro que HTB-37 forma monocapas, mientras que MF y el clon D5-G12 presentan estructuras que indican la formacion de multicapas. En las tres cepas la fosfatasa alcalina fue detectada desde el dia 5 de cultivo. HTB-37 crecio lentamente y presento los valores mas altos de TEER (908±33Ω*cm 2 ) y la menor cantidad transportada de amarillo de lucifer (0,29±0,07%). Esta linea tambien mostro mayores diferencias entre la permeabilidad de propranolol (marcador de alta permeabilidad) y furosemida (marcador de baja permeabilidad). Conclusiones: los resultados indican que la cepa HTB-37 es la mas idonea para uso en ensayos de permeabilidad en nuestro laboratorio y por lo tanto puede ser empleada para la validacion del modelo celular para la aplicacion del Sistema de Clasificacion Biofarmaceutica.