Con el fi n de mejorar los procesos de produccion de vainilla se propone el aislamiento y fusion de protoplastos de V. planifolia Jacks. Ex Andrews y V. pompona Schiede. En este proceso de mejoramiento se obtuvieron celulas hibridas con posible tolerancia a fusarium, hongo al cual es altamente susceptible V. planifolia. Para el aislamiento de protoplastos, de hojas de plantulas in vitro, se evaluaron tres enzimas ( Celulasa-C, Pectinasa-P y Driselasa-D ) , combinadas en tres diferentes tratamientos-T, asi: T1 ( 1% C +1% P ) , T2 ( 2% C + 1% P ) y T3 ( 2% C + 1% P + 1% D ) . Se evaluaron variables como numero de protoplastos aislados y viabilidad. Previo a la induccion quimica de hibridos con polietilenglicol-PEG ( 4% p/v ) , los protoplastos de V. pompona se tineron con sales de tetrazolio ( 1% ) , para identifi car las fusiones con los protoplastos no tenidos de V. planifolia. Como resultado, de los mejores tratamientos enzimaticos, se observa que para V. planifolia se dan en el tratamiento T1, y para V. pompona en el T2; con los siguientes porcentajes de protoplastos viables: 80.32% para V. planifolia, y 81.27% para V. pompona. En relacion a la fusion de protoplastos, en el tratamiento con PEG al 4%, se obtuvieron 3.16 x 10 protoplastos fusionados, lo que corresponde a un 15.6% de celulas hibridas. Lo anterior indica el gran potencial del proceso de aislamiento y produccion de celulas hibridas del genero Vanilla para el mejoramiento varietal del cultivo.