La Enfermedad de Parkinson (EP) es una enfermedad neurodegenerativa que afecta a hombres y mujeres mayores de 65 anos de edad. La disminucion de las neuronas dopaminergicas, en la sustancia negra (SNpc) causa perdida de la funcion ejecutiva y enlentecimiento del procesamiento de la informacion. Los modelos experimentales invitro, representan una alternativa para conocer el deterioro neuronal y disminuir el uso de animales en experimentacion. Por lo anterior, se propuso crear, estandarizar y validar un modelo innvitro de la EP, como precedente para la evaluacion de los mecanismos celulares implicados en la EP. Se establecieron cultivos primarios de mesencefalo fetal de ratas Wistar de 13 dias, fueron mantenidos con DMEM y medio Neurobasal, e incubados a 37 °C y CO2 al 5%. El dia 8 de cultivo se anadio la neurotoxina 6OHDA en diferentes concentraciones (nM): 25, 50, 75 y 100; se realizaron controles de supervivencia y de estres oxidativo a las 2, 12, 24 y 48 horas de la aplicacion de la neurotoxina, por inmunomarcaje de TH y tincion de Hoechst. El numero de neuronas dopaminergicas disminuye significativamente tras doce horas de exposicion a la neurotoxina 6-OHDA, cuya dosis letal media segun las dosis evaluadas, es a 25 nM, por tanto, el modelo de Parkinson in vitro basado en la lesion con 6 Hidroxidopamina evidencia similaridad de la respuesta celular evaluada In vivo, representando un modelo alternativo para el estudio de los mecanismos implicados en la muerte neuronal y para disminuir el uso de animales de experimentacion.