RESUMEN. Objetivo: Comparar la diferencia de longitud de penetracion del hipoclorito de sodio al emplear cuatro sistemas rotatorios de preparacion en conductos mesovestibulares de molares inferiores. Metodos: Estudio experimental in vitro en 80 raices mesiales de molares inferiores divididas aleatoriamente en cuatro grupos de 20 raices cada uno entre los sistemas de preparacion asi: grupo 1: Reciproc®; grupo 2: Mtwo®; grupo 3: WaveOne®; grupo 4: ProTaper®. Se obtuvo radiografia de conductometria, se preparo cada grupo segun la tecnica de instrumentacion, se irrigo con hipoclorito de sodio al 5,25 % y finalmente se introdujo en el canal radicular medio de contraste Iohexol. Obtenida la segunda radiografia, se calculo la diferencia con respecto a la conductometria para determinar la diferencia de longitud de penetracion (DLP). La DLP de acuerdo con los grupos de estudio se comparo a traves de la prueba H de Kruskal-Wallis (p<0,05). Resultados: La mediana de la conductometria global fue de 14,6 mm (RI: 2,41), la de penetracion de 13,9 mm (RI: 3,23) y la de diferencia de 0,03 mm (RI: 0,41). El grupo con menor LP fue WaveOne® (media: 0,020mm). Al comparar la LP entre los grupos, no se encontraron diferencias estadisticamente significativas (p=0,15). Conclusiones: Cualquiera de los cuatro sistemas evaluados en este estudio puede ser empleado para instrumentacion biomecanica de canales mesovestibulares de molares inferiores en endodoncia. La escogencia de un sistema se debe hacer solo teniendo en cuenta las caracteristicas clinicas de cada caso y el desempeno operativo de cada sistema.