RESUMEN El herpesvirus bovino-1 (BHV-1) es un virus de genoma DNA perteneciente a la familiaHerpesviridae, el cual afecta al bovino en el que provoca un amplio espectro de mani-festaciones clinicas y perdidas economicas. El principal componente inmunogenico desu envoltura es la glicoproteina D (gD), la cual ha sido caracterizada y utilizada comoinmunogeno en distintos sistemas de expresion. El objetivo de este trabajo fue generar unpoxvirus recombinante (Raccoonpox [RCN]) que expresara una version truncada de la gDdel BHV-1 para ser usado como inmunogeno. Para ello, se amplifico el gen que codificapara la version truncada de la gD, la cual se clono en el plasmido de transferencia pTK/IRES/tpa que posee sitios de homologia a la timidinakinasa del poxvirus, un sitio internode entrada al ribosoma (IRES) y una senal secretoria (tPA), generando el constructopTK/gD/IRES/tpa. Para generar el RCN recombinante, se tomaron celulas BSC-1, se in-fectaron con una cepa Silvestre del RCN (CDC/V71-I-85A) a un indice de multiplicidadde infeccion de 0,05 y se transfectaron con el constructo pTK/gD/IRES/tpa; generandosediferentes poblaciones virales con y sin el gen de interes. Para seleccionar los virusrecombinantes que expresaban el gen de interes, se realizo una seleccion de recombinantesnegativos para timidina kinasa y positivos para la gD por tres rondas de purificacion deplacas en monocapas de celulas RAT-2 las cuales son mutantes para timidina kinasa y enpresencia de bromodeoxiuridina. Los virus recombinantes se confirmaron por PCR ysecuenciacion de nucleotidos y se denominaron RCN-gD.