Para la prediccion de la permeabilidad intestinal de los farmacos, se han desarrollado diversos metodos experimentales, entre los que se destacan las determinaciones in vivo, in situ e in vitro. Las tres varian en complejidad experimental y en costo de ejecucion El siguiente trabajo tiene como objetivo principal estandarizar una metodologia de permeabilidad in vitro en monocapas de celulas Caco-2. La importancia de esta investigacion radica en la obligacion legal que tienen las industrias en Colombia de presentar estudios de biodisponibilidad y bioequivalencia para el registro sanitario de un medicamento. Para llevar a cabo la estandarizacion de la metodologia, se utilizaron monocapas diferenciadas de Caco-2, sobre las cuales se aplicaba una cantidad de farmaco conocida. Posteriormente en tiempos establecidos, se tomaban muestras para determinar la cantidad de farmaco que atravesaba la membrana, para la cuantificacion de estos valores, se utilizo una metodologia validada con tecnica UPLC. Adicionalmente, fue necesario medir la integridad de las membranas de manera directa e indirecta, por medio de la resistencia electrica transepitelial (TEER) y la permeabilidad del reactivo Amarillo de Lucifer, el cual responde a una tintura fluorescente y solo atraviesa la membrana cuando esta se encuentra integra y las uniones entre las celulas es adecuada. Con los resultados, se determinaron los coeficientes de permeabilidad aparente (Pap) para cada farmaco evaluado, Ampicilina y Metoprolol, reportados en cm/seg. Por otra parte, tambien se determinaron los coeficientes de permeabilidad de los mismos farmacos, en presencia del polimero PAM 18 Na. Los resultados obtenidos muestran un Pap para la Ampicilina de 1,02 x10-5 ± 1,4 x10-5 cm/seg en ausencia del polimero, y un Pap de 9,42 x10-7 ± 1,2 x10-7 cm/seg presencia del polimero.