Esta investigacion se realizo en el Laboratorio de Cultivo de Tejidos Vegetales del Instituto de Biotecnologia de la Universidad Nacional de Colombia (IBUN) y en los invernaderos de la Facultad de Agronomia, Sede Bogota. El proposito fue evaluar una metodologia para propagacion de plantulas y produccion de tuberculo semilla elite en cuatro variedades de papa: Solanum tuberosum L. ssp andigena (Diacol-Capiro, ICA-Purace y Parda Pastusa) y Solanum phureja Juz et Buk. (“Yema de huevo”-Clon 1), a partir de esquejes obtenidos de plantas provenientes de cultivos in vitro libres de virus, indexadas mediante prueba de ELISA. Una vez que las plantas eran adaptadas a condiciones ex vitro y alcanzaron una longitud de mas de 25 cm, se cortaron esquejes que portaban una yema apical con dos nudos y el esqueje axilar siguiente con la yema y su hoja. La base de estos se sumergio en soluciones de acido naftalenacetico (ANA) en concentraciones de 0 (control), 5, 10 y 15 mg/l durante una hora, despues fueron colocados en bandejas de enraizamiento que contenian turba como soporte. Tambien se utilizo un producto comercial (Hormonagro No.1) cuyo ingrediente activo es ANA al 0,04% para la induccion de raices en ambos tipos de esqueje como un ensayo adicional comparandolo con un control (sin aplicacion de enraizador); los esquejes se impregnaron con el polvo en su base e inmediatamente se pusieron en las bandejas de enraizamiento. Se hicieron ensayos independientes con cada variedad para evaluar los efectos de las dosis de ANA y Hormonagro sobre los dos tipos de esqueje (axilar y apical). Se evaluaron las siguientes variables respuesta: porcentaje de supervivencia de esquejes a la tercera semana, longitud y numero de hojas de esquejes durante tres semanas, area foliar y peso seco de esquejes a la cuarta semana. Despues de esto los esquejes se sembraron en bolsas plasticas de 10 x 14 pulgadas calibre seis y se llevaron a invernaderos donde se realizo el aporque y demas manejo agronomico. Luego de cumplido el ciclo vegetativo de las plantas se midieron los rendimientos (peso y numero de tuberculos) para cada tratamiento. Se utilizo un diseno completamente al azar para cada ensayo (dosis de ANA y Hormonagro) en cada variedad en un arreglo factorial 2 x 4 y 2 x 2 correspondientes al tipo de esqueje (axilar o apical) y concentracion de ANA (0, 5, 10 y 15 mg/l) en el primer caso y (sin Hormonagro y con Hormonagro) en el segundo caso. El porcentaje de supervivencia de esquejes fue superior al 90% en los axilares y mayor del 95% en los apicales. El Hormonagro redujo significativamente la supervivencia de esquejes y afecto considerablemente las otras variables. En los rendimientos no se observaron diferencias respecto al control por la aplicacion de Hormonagro. El regulador ANA en dosis entre 5 y 10 mg/l mostro ser conveniente para el prendimiento de los esquejes. Se obtuvo mayor peso total de tuberculos en esquejes axilares de las variedades Capiro y Purace, mientras que para la variable numero total de tuberculos los esquejes axilares de las variedades Capiro y Clon 1 mostraron los mejores promedios. La mayor cantidad de tuberculos-semilla cosechados pesaron entre 3 y 21 g. La aplicacion adecuada de la metodologia propuesta puede ayudar a reducir costos en produccion de semilla de papa fase 1 de buena calidad fitosanitaria.