ABSTRACT The aqueous extract of Phyllanthus orbicularis contains bioproducts able to significantly reduce the mutagenesis mediated by oxidative compounds. A bioactive-directed fractionation of the aqueous extract of P. orbicularis has been applied with the aim of identifying antimutagenic fractions, which allowed isolating and identifying some biocompound responsible for this activity. Antimutagenesis of all fractions was determined by the Salmonella retromutation assay, using hydrogen peroxide as model mutagen. Applying this methodology, two potent antimutagenic fractions have been obtained able to totally abolish the mutagenicity produced by hydrogen peroxide. In these fractions 2,4-di-tertbutylphenol, OO’-diphenol-4,4’,6,6’-tetra-tert-butyl and 2,6-di-sec-butylphenol were identified by Gas Chromatography/Mass Spectrometry. Keywords: P. orbicularis; 2,4-di-tert-butylphenol; OO’-diphenol-4,4’,6,6’-tetra-tert-butyl; 2,6-di-secbutylphenol; antimutagenesis; oxidative damage; chemical fractionation RESUMEN El extracto acuoso de Phyllanthus orbicularis es capaz de reducir significativamente la mutagenesis inducida por agentes oxidantes como el peroxido de hidrogeno y aminas aromaticas. Con el objetivo de identificar algun fitocomponente responsable de esta propiedad, se aplico un fraccionamiento quimico del extracto, guiado por el monitoreo de la referida bioactividad. La antimutagenicidad de cada fraccion frente al peroxido de hidrogeno se determino mediante el ensayo de retromutacion en la cepa TA102 de Salmonella typhimurium (Test Ames). La identificacion de los compuestos especificos se realizo por cromatografia gaseosa y espectrometria de masa. Se obtuvieron dos fracciones con alto grado de pureza cuya actividad antimutagenica fue capaz de abolir totalmente la mutagenicidad producida por el peroxido de hidrogeno. En una de estas fracciones se identificaron los compuestos 2,4-di-ter-butilfenol y su forma dimerica, OO'-diphenol-4,4',6,6'-tetra-ter-butil; en la otra, se identifico un solo compuesto, el 2,6-di-sec-butilfenol. Estos tres metabolitos secundarios pertenecen a la familia fitoquimica de los fenoles, en la cual se incluyen muchos de los agentes antioxidantes informados por la literatura especializada. Palabras clave: P. orbicularis; 2,4-di-ter-butilfenol; OO’-difenol-4,4’,6,6’-tetra-ter-butil; 2,6-di-sec-butilfenol; antimutagenesis; dano oxidativo; fraccionamiento quimico.