Los eventos reproductivos se encuentran influenciados por factores como la edad, el peso, la raza y el medio ambiente. El objetivo de la presente investigacion fue determinar diferencias en la respuesta de la aplicacion de un protocolo de inseminacion artificial a tiempo fijo (IATF) en novillas puras y cruzadas, con variaciones en los dias de aplicacion de la dosis de prostaglandina (PGF2α), sobre los porcentajes de prenez. El estudio se desarrollo en una finca del municipio de Barranca de Upia, Meta, Colombia. Se establecio un protocolo hormonal para realizar la IATF y las novillas se dividieron en dos grupos: el grupo 1 (n = 28), que recibio la dosis de prostaglandina en el dia seis del tratamiento, y el grupo 2 (n = 24), que recibio la dosis en el dia ocho. Se obtuvo un porcentaje de prenez general del 36,53 % y, por grupos, del 32,14 % y 41,67 % en los grupos 1 y 2, respectivamente. En relacion con las variables edad y peso por grupo y el porcentaje de prenez obtenido, se presentaron diferencias estadisticamente significativas (p ≤ 0,05). En conclusion, bajo las condiciones de este estudio, en novillas Brahman puras y cruzadas, la administracion de prostaglandina el dia seis del protocolo IATF presento una menor tasa de prenez, en comparacion con la aplicacion de la dosis de prostaglandina el dia ocho del protocolo de sincronizacion, lo cual sugiere que aplicar la dosis del agente luteolitico el dia seis del tratamiento no representa un aumento en la tasa de prenez.