RESUMEN Objetivo: Analizar la susceptibilidad antimicrobiana y la variabilidad genetica de algunas cepas de Mycobacteriumtuberculosis aisladas en la ciudad de Monteria. Metodos: Se incluyeron pacientes con diagnostico clinico de tuberculosis y se tomaron datos sociodemograficos yepidemiologicos. Las muestras de esputos se cultivaron en el medio de Lowenstein-Jensen. Se llevaron a cabo las pruebas desusceptibilidad antimicrobiana por el metodo de las proporciones multiples y rifoligotyping de segunda generacion . La varia-bilidad genetica se estudio a traves del RFLP. Resultados: Mycobacterium tuberculosis se aislo en 67 personas con tuberculosis pulmonar. La baciloscopia fue positivaen 59 (88%) y la edad estuvo entre 14 y 83 anos (media 41.5 anos). La resistencia fue 29.2% (14/48), y la multirresistencia 6.7% (3/48). La tecnica rifoligotyping descubrio 4 cepas con mutacion en el gen rpoB, region hot spot codon 531. El numero de copiasde IS 6110 vario entre 3 y 13 y 12 (48%) cepas presentaron entre 8 y 9 copias. El RFLP permitio establecer dos grupos A y B. El grupoA estuvo conformado por 20 (80%) cepas, con un unico cluster formado por los pacientes 17, 45, 54. El grupo B, conformado por5 (20%) cepas, con un unico cluster formado por los pacientes 31 y 32.