Una de las vias posibles para aumentar la eficacia de los metodos de transformacion genetica mediante Agrobacterium tumefaciens es la optimizacion de la capacidad de regeneracion de las plantas de interes. En la Universidad Nacional de Colombia, Sede Bogota, el grupo de Ingenieria Genetica de Plantas (IGP), ha venido trabajando en la obtencion de plantas transgenicas a partir de la variedad de papa Diacol Capiro. Es de interes llevar a cabo este tipo de procedimientos en otras variedades de papa colombiana. La variedad Pastusa Suprema es un cultivar obtenido mediante mejoramiento genetico convencional, que presenta cualidades superiores a otros cultivares. Es importante desarrollar un sistema eficiente de regeneracion en esta variedad, como soporte para ulteriores estudios de transferencia de genes que permitan optimizar aun mas su rendimiento. En este trabajo se evaluo el efecto de diferentes combinaciones hormonales adicionadas a un medio basico compuesto de sales Murashige y Skogg (1962), sobre el comportamiento callogenico y regenerativo de la variedad de Pastusa Suprema. Se realizo un diseno experimental factorial, en arreglo completamente al azar. Los factores corresponden a las hormonas acido naftalenacetico (ANA), acido giberelico (AG3) y ZR (Zeatina Ribosido), y los niveles son las concentraciones por factor ZR: 2,0 mg/L y 3,0 mg/L; ANA 0,0 mg/L, 0,02 mg/L, y 0,2 mg/L; y AG3: 0,02 mg/L, 1,0 mg/L. Los tratamientos probados corresponden a todas las combinaciones posibles entre los niveles de hormona evaluados, dando lugar a un total de doce tratamientos. La eficiencia del medio de cultivo se evaluo con base en las variables: porcentaje de induccion de callos, porcentaje de regeneracion, y numero de regenerantes por explante. El analisis de los datos se realizo con el software estadistico SAS version 8.0. La presencia de ANA demostro ser esencial en la respuesta callogenica y regenerativa de los explantes. Los tratamientos carentes de esta hormona mostraron porcentajes de induccion de callo y regeneracion muy bajos (16% +/- 11,3 y 15% +/- 11,7 respectivamente). Los tratamientos con una concentracion elevada de ANA (0,2 mg/L), formaron callo en un 100%, pero no alcanzaron un porcentaje de regeneracion adecuado (26% +/- 16). Los tratamientos en los que se utilizo una concentracion baja de ANA (0,02 mg/L), fueron eficientes tanto en la formacion de callo, como en la regeneracion (86,0 +/- 13 y 70 +/- 22%). El nivel de zeatina ribosido y acido giberelico utilizados en el medio, demostraron tambien ser estadisticamente significativos en el comportamiento callogenico y regenerativo. Los ensayos realizados demuestran la importancia de la combinacion de los tres tipos hormonales en la induccion de callo, y subsecuente regeneracion; probablemente, su interaccion a nivel fisiologico crea las condiciones necesarias para que el tejido se desdiferencie y exprese su totipotencialidad. Comparando los resultados obtenidos en los 12 tratamientos para cada una de las variables estudiadas se puede concluir que la adicion de 3 mg/L de zeatina ribosido, 0,02 mg/L de acido naftalenacetico y 1,0 mg/L de acido giberelico en el medio de cultivo, constituye una formulacion hormonal adecuada para inducir el proceso de organogenesis indirecta sobre la variedad de papa Pastusa Suprema, obteniendo porcentajes de regeneracion de 92,9 % +/- 4,9 y un numero medio de regenerantes por explante de 6,37 +/- 1,03 en un tiempo total de ocho semanas.