En el presente trabajo se realizo la caracterizacion cariologica y molecular de cuatro especies pertenecientes al genero Proechimys, las cuales fueron colectadas en diferentes regiones de Colombia y posteriormente ubicadas en colonias en el Bioterio de Experimentacion del Instituto Nacional de Salud-INS. El numero estimado de especies varia segun el criterio de diferentes autores lo cual reflejan la gran dificultad para establecer limites en Proechimys a sus taxones subordinados. En general, los caracteres morfologicos son la aproximacion usual para evaluar las preguntas sistematicas por la mayoria de mastozoologos, pero esto ha sido relativamente improductivo en Proechimys. Como consecuencia de las variaciones morfologicas presentadas en los individuos, varios autores se han centrado sobre este aspecto, buscando la manera mas adecuada de establecer diferencias entre las especies y han recurrido a tecnicas de tipo genetico y molecular que permitan esclarecer la separacion especifica de los grupos. Para este trabajo la caracterizacion cariologica se llevo a cabo a partir de la tecnica de cultivo de linfocitos de sangre periferica. La caracterizacion molecular se realizo a partir de un fragmento de 800 pares de bases del gen Citocromo B. Para la construccion de los arboles se utilizaron otras secuencias para Proechimys, disponibles en Genbank y se incluyeron secuencias suministradas, en calidad de prestamo, por el Doctor James Patton de la Universidad de California, Berkeley. Se confirmo, por medio de informacion cariologica y molecular, que los individuos de la colonia del INS pertenecen a cuatro especies diferentes las cuales fueron identificadas como: Proechimys chrysaeolus (departamento de Santander), P. sp. “Barinas” (departamento de Casanare), P. oconnelli (departamento de Casanare) y P. canicollis (departamento de La Guajira). Los tiempos de divergencia obtenidos para las especies (entre 2,89 MA y 5,92 MA) se aproximan al Mioceno, epoca en la cual se presume que Proechimys evoluciono en la Amazonia. Tres de las cuatro especies de este estudio son incluidas dentro de los grupos propuestos por Patton (1987): P. chrysaeolus, grupo trinitatus, P. canicollis, grupo canicollis (monotipico) y P. oconnelli, grupo semispinosus. La forma nominal P. sp. “Barinas” no es referida por este autor.