Los tejidos fijados en formol e incluidos en parafina son una fuente de material para hallazgos moleculares en el ambito clinico y cientifico, demostrandose que el ADN extraido de estos, es adecuado para amplificacion a traves de la reaccion en cadena de la polimerasa (RCP). En este estudio, se ensayaron tres metodos de extraccion de ADN en tejidos incluidos en parafina, con el objetivo de comparar la eficiencia de estos para obtener ADN adecuado, ademas se analizo su utilidad en amplificacion por RCP. Se emplearon tres muestras, correspondientes a una biopsia de pulmon, legrado endometrial y ganglio linfatico, todas fijadas en formaldehido al 10% e incluidas en parafina. Utilizandose tres metodos diferentes de extraccion de ADN (extraccion por salting out, metodo modificado de Sambrook y kit comercial) El ADN obtenido se cuantifico por espectrofotometria, ademas se realizo electroforesis en gel de agarosa al 1%, para comprobar si el ADN era de buena calidad y se realizo RCP para el exon 3 del gen caveolina 1. Todos los metodos dieron como resultado una buen producto de ADN genomico, observandose mayor cantidad y pureza en los metodos de salting out y kit comercial, asimismo se obtuvo amplificacion del producto esperado por estos dos metodos, no hubo buenos resultados con el ADN extraido por el metodo modificado Preparation of Genomic DNA from Mouse Tails y Other Small samples, segun Sambrook. El ADN obtenido a partir de tejidos FFIP puede ser amplificado por varios metodos, entre estos, la extraccion por salting out es util y con poca toxicidad, permite obtener ADN de buena calidad para amplificacion por RCP.
Tópico:
Molecular Biology Techniques and Applications
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FuenteDOAJ (DOAJ: Directory of Open Access Journals)