Observaciones al microscopio electronico de virus vaccinia previamente incubados en una mezcla para la reaccion de RNA polimerasa in vitro, demuestran caracteristicas alteraciones morfologicas en los virus. Estructuras similares a vesiculas y ocasionalmente tubulos se formaron a partir de la membrana externa del virus. Uno de los sustituyentes de la reaccion de RNA polimerasa in vitro, mercaptoetanol 0.007M, es el causante de esta alteracion. El cambio morfologico se acompana de perdida de la infectividad viral. La presencia de grupos sulfhidrilo en la mezcla de la reaccion enzimatica es esencial para la ocurrencia de la sintesis de RNA de vaccinia in vitro. Esta condicion no se pudo sustituir por choque termico a 70C. ni por digestion parcial del virus por tripsina. Una gran variedad de compuestos con grupos sulfhidrilo pueden reemplazar el mercaptoetanol con efectividad variable. El mas activo de ellos fue el ditiotreitol. Un periodo de latencia de 8 minutos ocurre entre la adicion de vaccinia a la mezcla completa para la reaccion de RNA polimerasa y la deteccion de sintesis de RNA. Los datos recolectados sugieren que cambios dependientes del mercaptoetanol ocurren durante este periodo.
Tópico:
Protein purification and stability
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FuenteDOAJ (DOAJ: Directory of Open Access Journals)