El gusano cogollero del maiz Spodoptera frugiperda (J.E. Smith) es considerado la plaga mas importante del cultivo en el mundo. En varios paises se han empleado exitosamente los nucleopoliedrovirus de la familia Baculoviridae para su control. Sin embargo, en Colombia, no se cuenta ningun bioplaguicida viral registrado para el control de la plaga. En el presente trabajo, se realizo la busqueda de aislamientos nativos de nucleopoliedrovirus en los departamentos de Tolima, Meta y Cordoba, mediante la recoleccion de larvas en diferentes cultivos. Las muestras fueron analizadas por microscopia para la busqueda de particulas virales y los aislamientos encontrados se caracterizaron fisica y biologicamente. Se recolectaron 2.140 larvas de S. frugiperda en los tres departamentos muestreados. Sin embargo, solo en un lugar (Cerete, Cordoba), se encontraron larvas con sintomas de infeccion viral en campo. El 2% de las muestras colectadas mostraron sintomas tipicos de infeccion y en total se identificaron 3 aislamientos codificados como NPV003 (Cordoba), NPV009 (Tolima) y NPV011 (Meta). Los aislamientos presentaron un tamano de particula entre 1,93 μm y 2,14 μm. Las concentraciones letales medias (CL50) sobre larvas neonatas oscilaron entre 2,2 x 105 CI/mL y 7,0 x 105 CI/mL y no se registraron estadisticas entre los aislamientos, sugiriendo que todos tienen la misma patogenicidad sobre larvas neonatas del insecto. Estos virus nativos representan la base para el desarrollo de una nueva alternativa biologica para el control de la plaga, siendo necesario iniciar los estudios para su formulacion.