SaludRESUMENEn la actualidad los cultivos celulares tridimensionales son muy utilizados, ya que imitan lascondiciones in vivode las celulas. Uno de los cultivos mas desarrollados es el de fibroblastosdermicos dentro de geles de colageno en forma de lenteja, los cuales se contraen de un 70%a un 80% durante las primeras 24 horas de cultivo. El objetivo inicial de este trabajo fue aislarfibroblastos endoneurales (FE) del nervio ciatico de ratones ICR, mantenerlos en cultivo enmonocapa y luego en cultivo tridimensional en geles cilindricos de colageno tipo I de 1,6 mmde diametro y 3 mm de largo, formados en las protesis de silicona empleadas para regeneracionde nervios perifericos; imitando las condiciones del nervio in vivopara que pueda ser emplea-dos en regeneracion. Inicialmente se retira epineuro y perineuro del nervio, dejando solo elendoneuro que se disocia con colagenasa (500U/ml) y luego se le hace una disociacion me-canica. Las celulas libres, se cultivan en monocapa con DMEM suplementado con 20% suerobovino fetal, logrando un 95% de pureza en cultivo primario; en los subcultivos se purifican yamplifican los FE. Estos se aislan y se mezclan con una solucion de colageno tipo I a 0,5mg/mlpara la formacion de los geles, teniendo en cuenta que cada gel contenga 50.000 fibroblastos,se introduce la mezcla dentro de las protesis de silicona y se dejan gelificar, siguiendo el mismoprocedimiento se formaron geles sin celulas; una vez formados los geles se liberan de las cama-ras y se cultivan en suspension 1, 3, 5, 7, 15 y 30 dias. Al cumplirse cada uno de los tiemposde cultivo, se analizo la apariencia del colageno y la distribucion de los FE en microscopiaoptica y de fluorescencia. Los cultivos primarios de FE se obtuvieron a los 5 dias, lograndoacortar el tiempo de confluencia entre 15 y 20 dias con respecto a lo reportado en la literatura;un dato novedoso fue la purificacion total de los FE en el primer subcultivo. En los geles sincelulas se observa una degradacion progresiva del colageno que se evidencia por primera vez alos 15 dias de cultivo y es total a los 30 dias. Durante los primeros 7 dias de cultivo, los FEdentro de los geles tuvieron una viabilidad alta (superior al 80%) y se distribuyeron homo-geneamente; ademas la contraccion de los geles es muy leve, del 60% a los 7 dias. En el dia 15 se observo una migracion de las celulas hacia la periferia y los geles se contrajeron en un 63%y el colageno se observa muy degradado. A los 30 dias la contraccion del gel es del 70%, laviabilidad de los fibroblastos es muy baja y el colageno esta casi totalmente degradado. Estetrabajo presenta por primera vez el aislamiento de fibroblastos endoneurales y su cultivo tri-dimensional, ademas de la utilizacion de geles en forma de cilindro; en donde los FE se distr-ibuyen homogeneamente y producen una contraccion relativamente baja de los geles en losprimero 7 dias de cultivo. Estos geles tridimensionales imitan la morfologia del endoneuro.