Se establecieron las condiciones de cultivo in vitro de los helechos cuerno de alce y nido de ave; realizando dos metodologias para incrementar el numero de esporas: raspado y maceracion de esporangios y variaciones en temperatura de 20, 30 y 45 oC para la liberacion directa de hoja, con 15, 30, 45 min, de forma correspondiente. Para la desinfeccion se variaron los tiempos de inmersion de 10, 15 y 20 min en hipoclorito de sodio al 5%. Previa inoculacion se realizo el conteo en camara de Newbauer, para determinar el numero de celulas por mililitro siendo esta de 500 para P. bifurcatum y 150 en A. nidus. El menor porcentaje de contaminacion y viabilidad se obtuvo con inmersion con hipoclorito por 15 min. Aunque la incubacion a mayor temperatura (45 oC) permitio mayor obtencion de esporas, se obtuvo menor viabilidad. Las esporas fueron transferidas a medios Murashige Skoog (MS) base sin tiamina y MS suplementado con diversos compuestos: acido 2,4-diclorofenoxiacetico (MS1), bencilaminopurina (MS2) y acido naftalenacetico (MS3), en concentraciones entre 2,5 a 7,5 mg/L. La aparicion de los primeros brotes para P. bifurcatum y A. nidus se observo en los tres y cuatro meses despues de la siembra, los mejores resultados en brotacion para P. bifurcatum corresponden a los medios: MS1 (2,5 y 5,0 mg/L), MS2 (5,0 y 7,5 mg/L) y MS3 (2,5, 5,0 y 7,5 y mg/L). Para A. nidus, los medios MS1 (2,5 y 7,5 mg/L) y MS3 (7,5 mg/L), mostraron los mejores resultados. Los brotes obtenidos fueron transferidos a medios MS liquido, solido y semisolido, con resultados optimos en medio liquido y MS con 1,0% de agar.
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Fern and Epiphyte Biology
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FuenteDOAJ (DOAJ: Directory of Open Access Journals)