El objetivo de este trabajo fue expresar la enzima humana iduronato 2-sulfato sulfatasa en la levadura metilotrofica Pichia pastoris. La deficiencia de esta enzima causa una enfermedad denominada Sindrome de Hunter. Siete clones fueron seleccionados por PCR (10, 28, 92, 94, 144, 149 y 153) al amplificar una banda de 826pb, indicativo de la presencia de la IDSh y de la orientacion del fragmento. Diferentes medios de cultivo se emplearon en la fase de crecimiento (YPG, YPGli y BMGliY), la fase de induccion fue llevada a cabo cambiando el medio de crecimiento por BMMY. Una vez crecido en YPGli, los clones 10, 28, 144, 149 y 153 mostraron actividad IDS de 1.53, 2.95, 4.35, 4,07 y 4.15 nmol/h mg a las 24, 48,72 y 120h de induccion respectivamente. El clon 28 produjo 4.21nmol/h mg al crecer en YPG; solo los clones 92 y 94 produjeron mejores actividades cuando se crecieron en BMGliY; reportando 1.62 y 1.20nmol/mg h respectivamente. La produccion de la IDShr se logro en fermentador de 1l, con medio salino (MBS-sF) con el clon IDS28. El crecimiento se realizo en cultivo discontinuo utilizando glicerol (fuente de carbono y energia) hasta obtener 12.08g/l de biomasa seca. Para el paso de induccion se utilizo un cultivo alimentado con metanol (<1% (v/v)); este ultimo sirvio como fuente de carbono y energia e indujo la expresion de IDShr actuando sobre el promotor nativo AOX1 presente en el constructo pPIC9-IDSh. La actividad especifica oscilo entre 25.4 y 29.36 nmol/mg h. Se destaca que el valor de referencia de nuestro laboratorio para la IDSh en plasma humano es 12.58 nmol/mg h.