A partir de una cepa de A. hydrophila aislada de un brote de enfermedad septicemica en Tilapia nilotica (Piaractus brachypomusoreochromis niloticus), se obtuvieron extractos de lipopolisacarido (LPS) crudo (29,5 mg/ml) y semipurificado (106,5 mg/ml) mediante la tecnica fenol-agua caliente descrita por Westphal, Jann (1965). La presencia de proteina fue del 2,3% para el extracto crudo y de 0,1% para el semipurificado; la concentracion de polisacaridos oscilo entre el 15 y 26%. En electroforesis (SDS-PAGE) se observaron bandas de 14 Kd correspondientes al oligosacarido central y al lipido A del LPS. Tres ratones de 25-35 g fueron inoculados intraperitonealmente con 25 mg/Kg de LPS cru-do, a partir de la primera hora todos los animales mostraron erizamiento, taquipnea e inapetencia; microscopicamente se detecto congestion hepatica y pulmonar, hemorragias pulmonares y renales, marginacion leucocitaria en higado y pulmon con predominio de polimorfo-nucleares neutrofilos (PMN) en todos los animales, mostrando un mayor efecto que el control inoculado con LPS de E. coli (Sigma®) a la misma concentracion. In vitro el LPS crudo a concentracion de 10, 20 y 30 µg/ml indujo proliferacion de celulas mono-nucleares murinas (2 x 10 5 en 200 µl de medio DMEM) por incorporacion de timidina tritiada; tanto el LPS control (E. coli), como el LPS crudo de A. hydrophila mostraron cuentas por minuto (CPM ) ascendentes de manera dosis dependiente, el LPS de A. hydrophila desencadeno una proliferacion muy similar a la inducida por el control.
Tópico:
Aquaculture disease management and microbiota
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FuenteDOAJ (DOAJ: Directory of Open Access Journals)