Antecedentes. La causa mas comun de resistencia a antibioticos aminoglucosidos en bacterias Gram positivas, especialmente en S. epidermidis, es la enzima modificante AAC(6’)-APH(2), capaz de acetilar y fosforilar un amplio rango de antibioticos. Objetivo. Determinar la presencia del gen aac(6’)-aph(2) en cepas de Staphylococcus coagulasa negativa aisladas en infecciones neonatales, e investigar la concordancia con las pruebas de sensibilidad in-vitro. Material y metodos. Se determino la presencia del gen aac(6’)-aph(2) en 63 cepas de estafilococos coagulasa negativa provenientes de hemocultivos y puntas de cateter, de la Unidad de Neonatologia del Instituto Materno Infantil, en Bogota. Resultados. Staphylococcus epidermidis fue el germen mas frecuente y el gen aac(6’)-aph(2) estaba presente en 55 (87,3%) cepas; de estas, 42 (73,4%) cepas provenian de hemocultivos y 13 (23,6%) cepas de punta de cateter. La susceptibilidad a gentamicina se determino mediante concentracion inhibitoria minima y para amikacina por difusion en disco. No se encontro asociacion estadisticamente significativa entre la presencia del gen aac(6’)-aph(2) y la resistencia a gentamicina y amikacina. Conclusion. La presencia del gen aac(6’)-aph(2) de resistencia a aminoglucosidos es muy alta en cepas de Staphylococcus epidermidis. Diferencias en la expresion del gen pueden explicar parcialmente la falta de consistencia con las pruebas de susceptibilidad utilizadas en la clinica.