El mildeo velloso de la rosa es la enfermedad mas limitante de este cultivo en Colombia. Aunque algunos trabajos de investigacion se han adelantado recientemente sobre la epidemiologia de esta enfermedad, uno de los campos menos estudiados es el nivel de variabilidad de su agente causal. El conocimiento de este aspecto es fundamental para definir las estrategias de manejo, especialmente aquellas relacionadas con la resistencia genetica y el control quimico. Los objetivos de esta investigacion fueron confirmar la identidad taxonomica del agente causal del mildeo velloso de la rosa y profundizar en el conocimiento de su estructura poblacional en Colombia. Para esto se colectaron 34 aislamientos del pseudohongo en cultivos de rosas ubicados en Antioquia y la sabana de Bogota y se extrajo su ADN, para proceder a la amplificacion mediante PCR de la region ITS del ADNr utilizando los primers especieespecificos PS3 y PS1. Dichos productos se emplearon tanto para su secuenciacion directa como para la evaluacion de variabilidad genetica mediante la tecnica PCRRFLP, resultados que se complementaron con la utilizacion de los marcadores RAPD y RAMS. La presencia de un amplicon de aproximadamente 700 pb que compartio un porcentaje de identidad del 100% con secuencias depositadas en el GenBank, permitio confirmar a los aislamientos como pertenecientes a Peronospora sparsa, mientras que el analisis de RFLP, RAPD y RAMS indico un muy bajo nivel de variabilidad entre todos los aislamientos, concluyendose que la poblacion de P. sparsa en Colombia es predominantemente clonal