Introduccion la amplificacion de marcadores geneticos tipo STR's a partir de restos oseos, esta condicionada a la calidad y cantidad del ADN, uno de los principales problemas es la degradacion de la molecula, que se ve reflejada en fragmentos muy cortos que impiden la union de los primer a las secuencias especificas de ADN, dando como resultado ausencia de amplificacion o perfiles geneticos deficientes. Con los actuales desarrollos de la tecnologia, se han disenado nuevos marcadores geneticos, como los SNP's, que permiten obtener perfiles geneticos a partir de muestras que tienen cantidades trazas de ADN y/o que esta degradado, lo que se ha reflejado en la tipificacion exitosa de muestras dificiles como los restos oseos. Objetivos Tipificar y analizar muestras de restos oseos con SNP's, que previamente, no amplificaron con marcadores geneticos tipo STR's. Demostrar la capacidad de amplificacion de los marcadores SNP's en muestras restos oseos que contienen ADN degradado y/o con muy poca cantidad. Materiales y Metodos Se analizaron 10 muestras de 5 individuos diferentes. Se tomaron dos muestras por individuo: un fragmento de aproximadamente 10 cm. de femur derecho y de femur izquierdo. A todas las muestras se les realizo extraccion de ADN por el metodo Fenol-Cloroformo. La amplificacion de ADN con marcadores geneticos STR's, se realizo con los kits comerciales: Identifiler® (Applied Biosystems) y Power- Plex 16HS® (Promega), adicionalmente se realizaron amplificaciones con mini STR's: Minifiler® (Applied Biosystems) y PowerPlex S5® (Promega). La amplificacion de ADN con marcadores geneticos SNP's autosomicos se realizo en el laboratorio del Instituto de Medicina Legal de la Universidad de Santiago de Compostela. La tipificacion se realizo por electroforesis capilar en Analizador Genetico AB 3130 (Applied Biosystems).
Tópico:
dental development and anomalies
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FuenteDOAJ (DOAJ: Directory of Open Access Journals)