El empleo de cultivos celulares en investigaciones entomologicas se inicio a comienzos del siglo XX, desde entonces se han desarrollado sistemas de cultivo mas eficientes y apropiados para el establecimiento de lineas celulares de crecimiento continuo, que han sido esenciales para estudios de patologia, fisiologia, biologia molecular y del desarrollo y en biotecnologia como modelos para la expresion de genes foraneos. Existe un altisimo porcentaje de especies de las que no se han establecido lineas celulares o cuyo establecimiento es extremadamente dificil, lo cual se debe en gran medida del escaso conocimiento que se tiene sobre los requerimientos nutricionales y del ambiente de cultivo de cada tipo celular estudiado. Para Apis mellifera no se conoce ninguna linea celular establecida a pesar de que es un excelente modelo experimental. Este trabajo tuvo como objetivo determinar el efecto de factores fisico-quimicos sobre cultivos celulares primarios de corto termino desarrollados a partir de hemocitos de Apis mellifera (Hymenoptera: Apoidea). Para cumplir con este objetivo, se realizaron cultivos de hemocitos obtenidos de larvas de quinto instar de 0,1537 gramos, en las cuales se obtuvo un volumen alto de hemolinfa (45μL) con una mayor cantidad de hemocitos en suspension y alta pureza y esterilidad. Para determinar los valores de pH, osmolalidad, temperatura de incubacion, medio de cultivo y concentracion de estimulantes del crecimiento en los que los hemocitos presentaban mayor adaptabilidad estimada en una mayor area, morfologia normal con membrana integra, adherencia y alto porcentaje de viabilidad, se realizaron ensayos sucesivos modificando en cada experimento uno de estos factores mientras se mantenian los otros constantes. Se realizaron observaciones, conteos y mediciones de las celulas en suspension y luego de tres y 120 horas de cultivo por analisis en el programa ImageJ (1.29) de imagenes capturadas en estos lapsos de tiempo. Se encontro una viabilidad del 100% y un area mediana de 14,41 μm2 en los hemocitos en suspension. Se establecio que las condiciones mas favorables para el mantenimiento de hemocitos de Apis mellifera en cultivo fueron: pH 7,2, osmolalidad 500 mmol/kg, temperatura de incubacion 27° C, medio TC-199, sin adicion de suero fetal bovino y con fitohemaglutinina a 16 μg/ml, con las cuales se obtuvo luego de 120 horas de cultivo un porcentaje de viabilidad de 92,7%, area mediana de 112,42 μm2, alta cantidad de filopodios, morfologia alargada y muchas vacuolas y granulos. El suero fetal bovino y la favina a cualquier concentracion tuvieron efectos nocivos sobre estas celulas.