La sarna polvosa de la papa ( Solanum tuberosum , S. phureja ) causada por Spongospora subterranea f. sp. subterranea (Sss), es una de las enfermedades mas limitantes de este cultivo. En Colombia, se han empleado diferentes metodos de deteccion asintomatica de Sss, incluyendo bioensayos con plantas senuelo, PCR de ITS y pruebas de ELISA. Sin embargo, sus niveles de sensibilidad son bajos o requieren tiempos extensos. Una alternativa para complementar dichas herramientas es la PCR cuantitativa en tiempo real (qPCR). En este trabajo se evaluo dicha tecnica utilizando los juegos de cebadores SsTQF1-SsTQR1; Spon421F-Spon494R y SscolF-SscolR (disenados en este estudio), bajo la metodologia de SYBR Green®; mientras que con Taqman® se evaluaron los cebadores SponF-SponR y la sonda SponP. Una vez determinada la funcionalidad de los cebadores, se descarto por inespecificidad, el par Spon421F-Spon494R; para los restantes se realizaron curvas estandar basadas en diluciones seriadas de quistosoros. Las pruebas de qPCR detectaron a Sss en las 20 muestras evaluadas de plantas senuelo de Nicotiana benthamiana y papa, utilizando los cebadores SsTQF1-SsTQR1 (Ct: 10,57- 29,34) y SscolF-SscolR (Ct: 14,39-34,08); mientras que 19 de las muestras fueron positivas con SponF-SponR-SponP (Ct: 15,63-38,93). A partir de 20 muestras de raices de papa de cultivos de La Union (Antioquia, Colombia), fue posible detectar el patogeno en 17 de ellas con SscolF-SscolR, estimandose una concentracion de 6470 a 1,39 x 10 10 quistorosos/mL. Estos resultados indican la ocurrencia de altos niveles de inoculo de Sss en esta region y enfatizan en la necesidad de fortalecer los programas de certificacion de tuberculo-semilla en Colombia.
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Plant Disease Resistance and Genetics
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FuenteDOAJ (DOAJ: Directory of Open Access Journals)