RESUMEN Objetivo: Disenar y estandarizar un sistema de PCR para detectar un amplio espectro de tipos de VPH en una sola reaccion utilizando como blanco la region E6 del genoma viral. Metodos: Utilizando secuencias del gen E6 de distintos tipos de VPH del NCBI y las herramientas informaticas Mult Alin version 5.4.1. y Oligo Analyzer 1.1.2 se disenaron oligonucleotidos degenerados que permitian la amplificacion de un fragmento de aproximadamente 214 pb. Las muestras seleccionadas incluyen: 25 muestras de ADN, cada una positiva para un solo tipo de VPH tipificados por el sistema PCR-RFLP MY11/MY09 del gen L1. Resultados: Se obtuvieron amplificados de aproximadamente 214 pb de 25 tipos distintos de VPH, se detectaron amplificados de E6 en muestras negativas para el sistema MY09/MY11. Conclusiones: Se pudo determinar que el diseno de los oligonucleotidos degenerados fue altamente eficiente para la amplificacion de por lo menos 25 tipos distintos de VPH lo que facilitaria la deteccion en muestras clinicas.
Tópico:
Cervical Cancer and HPV Research
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FuenteRevista de Obstetricia y Ginecología de Venezuela