Resumen Se estandarizo una prueba de ELISA para la deteccion de anticuerpos anti-F. hepatica en leche de bovinos. Se emplearon 80 muestras, de las cuales 44 se usaron como control positivo y 36 como control negativo. Como control de reactividad cruzada se utilizaron muestras de bovinos que presentaron en las heces huevos de un paramphistomido. La sensibilidad y especificidad diagnostica de la prueba fueron del 80% y del 72,2% respectivamente, con un intervalo de confianza del 95%. Los resultados obtenidos son comparables con los reportados en estudios realizados en otros paises. Se propone la prueba estandarizada como herramienta diagnostica alternativa y de tamizaje en estudios epidemiologicos de fasciolosis. Abstract We standardized an ELISA test for the detection of anti-F. hepatica antibodies in bovine milk. A total of 80 samples were used, of which 44 were used as positive controls and 36 as negative controls. Milk samples from bovines presenting paramphistomidae eggs in feces were used as cross-reactivity controls. Sensitivity and specificity of the diagnostic test were 80 and 72,2%, respectively, with 95% confidence interval. These results are comparable with those reported in studies conducted in other countries. We propose this standardized test as an alternative diagnostic and screening tool in epidemiological studies of fasciolosis. Resumo Estandardizou-se um teste de ELISA para a deteccao de anticorpos anti Fasciola hepatica no leite de bovinos. Empregaram-se 80 amostras, das quais 44 usaram-se como controle positivo e 36 como controle negativo. Como controle da reatividade cruzada utilizaram-se amostras de bovinos que apresentaram ovos de um paramphistomido nas fezes. A sensibilidade e especificidade diagnosticam do teste foi de 80 e 72% respectivamente, com um intervalo de confianca de 95%. Os resultados obtidos sao comparaveis com os reportados em estudos realizados em outros paises. Propoe-se o teste estandardizado como ferramenta diagnostica alternativa e de tamisado em estudos epidemiologicos de fascioliase.