Los canceres gastrointestinales (CGI) principalmente el de estomago y colorrectal (CCR) son neoplasias frecuentes en la poblacion mundial y presentan altas tasas de mortalidad. El desarrollo del CCR se origina por diferentes vias, como la inestabilidad cromosomica (CIN) que involucra la inactivacion del gen APC y TP53, la amplificacion de K-RAS y mutaciones en otros genes como DCC, Smad 2/4; tambien se caracteriza por alteraciones cromosomicas, perdida de heterocigocidad (LOH) e inestabilidad telomerica. Otra via es la mutadora, relacionada con alteracion0es en los genes del sistema de reparacion de bases mal apareadas (MLH1 y MSH2) e inestabilidad microsatelital (MSI), generada por la expansion de secuencias repetidas de DNA. Por ultimo, se tiene la via de la metilacion, un mecanismo epigenetico que regula la expresion genica mediante la metilacion de promotores de determinados genes y cambios en el patron de metilacion de proteinas histonas. El objetivo de este estudio es identificar mutaciones presentes en los genes APC, K-RAS y TP53 en individuos con CGl. Se analizaran 50 muestras de CGI (25 de CCR y 25 de estomago); se les realizara extraccion de DNA y PCR; para amplificar la region MCR del exon 15 del gen APC se utilizaran 3 pares de cebadores; para el exon 2 de K-RAS se usara un par de cebadores y dos pares para los exones 5 al 8 de TP53; los amplicones se correran en un gel de agarosa al 2%. Luego, los productos de PCR se purificaran para secuenciar las dos cadenas de DNA utilizando el metodo de terminacion de cadena de Sanger. Las secuencias se editaran y analizaran mediante el programa ChromasPro, se alinearan con las informadas en el GenBank y los resultados obtenidos se registraran en tablas utilizando el programa Excel; el analisis de graficas y estadistica descriptiva se realizara en el programa Statistica 6.0 (StatSoft). En la actualidad se tienen recolectadas 50 muestras de CGI, asi como, estandarizados los protocolos para la amplificacion de los cebadores del gen TP53 y APC, mientras que para el gen K-RAS se esta en la fase de estandarizacion, finalizada esta, se iniciara la amplificacion de los genes en todas las muestras para su posterior secuenciamiento. Se espera detectar mutaciones en todos los genes analizados.
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Ethics and bioethics in healthcare
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FuenteDOAJ (DOAJ: Directory of Open Access Journals)