El Mycoplasma hyopneumoniae es el agente causal de la Neumonia enzootica porcina, una de las enfermedades mas importantes en la industria porcina. En la actualidad, el proceso de diagnostico ante-mortem es una de las principales diicultades, dadas la poca sensibilidad y especiicidad de las tecnicas que se utilizan. El proposito de esta investigacion fue estandarizar la tecnica de Reaccion en Cadena de la Polimerasa (PCR) anidada para la deteccion de Mycoplasma hyopneumoniae, utilizando diferentes metodos de extraccion del ADN, tanto comerciales como convencionales. Para determinar la sensibilidad de la tecnica se realizaron diluciones seriadas al cultivo de Mycoplasma hyopneumoniae, cepa J, mantenida en medio Friis. Tambien se evaluaron algunas modiicaciones hechas a la mezcla de la reaccion de PCR tradicional reportadas en la literatura y, una vez ajustada, la tecnica fue aplicada en muestras clinicas como hisopados nasales y lavados traqueobronquiales. Los mejores resultados fueron obtenidos cuando el ADN se extrajo de la bacteria por calor y se trato con proteinasa K para luego ser utilizado en una reaccion de PCR - anidado que no contenia estabilizadores de la Taq-polimerasa, como el glicerol o la seroalbumina bovina. Bajo estas condiciones, se logro detectar M. hyopneumoniae hasta la dilucion de 10-5 de un cultivo puro de la cepa J de referencia y tambien a partir de algunas muestras clinicas.