Objetivo: Determinar si el estrés laboral repercute en la percepción subjetiva de bienestar psicológico del personal asistencial de un hospital de Medellín, Colombia. Material y Método: Estudio con diseño cuantitativo, no experimental, transversal; la unidad de análisis fue el personal asistencial conformado por enfermeras/os, auxiliares de enfermería, médicos generales y especialistas; el muestreo no probabilístico intencional fue de 129 participantes; la modalidad de medición fue híbrida utilizando un cuestionario aplicado por Google Forms que midió 2 variables: Estrés laboral y Bienestar psicológico; el pilotaje se realizó con 10 participantes de diferentes departamentos del centro hospitalario; la recolección finalizó en junio de 2022; para el análisis estadístico descriptivo se aplicaron medidas de tendencia central y las correlaciones se realizaron con el coeficiente Rho de Spearman. Resultados: Los participantes mostraron un agotamiento laboral moderado y un bienestar psicológico bajo; los niveles más bajos de bienestar psicológico se correlacionaron con un mayor estrés laboral; la despersonalización y el agotamiento emocional tuvieron el mayor impacto en la reducción del bienestar psicológico; los hombres reportaron niveles más altos de bienestar psicológico que las mujeres. Conclusiones: Es importante fomentar el bienestar psicológico y la implementación de estrategias de manejo del estrés laboral en entornos laborales de la salud, no sólo desde una perspectiva organizacional, sino también cultural y social.