Introducción: La leptospirosis es una enfermedad zoonótica de distribución mundial que afecta a los animales domésticos y salvajes, que eliminan el microorganismo por la orina. Los seres humanos son huéspedes accidentales y pueden presentar desde una enfermedad leve y autolimitada hasta una enfermedad mortal con insuficiencia multiorgánica. Objetivo: Determinar la prevalencia de 13 serovares de Leptospira en sueros de humanos ubicados en 20 localidades del Distrito Capital. Método: Estudio epidemiológico transversal entre agosto del 2006 y marzo del 2007, luego de procesar 1.307 sueros de humanos. Resultados: Los 1.307 sueros de humanos procesados se enfrentaron a 13 serovares, de los cuales resultaron positivos 165 sueros (230 reacciones positivas) y negativos resultaron 1.142 sueros. Se utilizó la microaglutinación (MAT) como la prueba serológica de referencia para el diagnóstico de esta enfermedad. La prevalencia determinada para humanos fue de 12,62, situación que refleja la importancia de esta zoonosis. Conclusión: Es necesario desarrollar campañas de tipo educativo enfocadas en las personas en riesgo y en los propietarios de animales para que aprendan a reconocer estas zoonosis, con el fin de facilitar el diagnóstico y el tratamiento.