Se confirmó la presencia del biotipo B de Bemisia tabaci (Gennadius) en Colombia mediante estudios de carácter bioquímico, molecular y etiológico. La identificación bioquímica consistió en la determinación de patrones de bandas de esterasas no específicas. Se encontró polimorfismo entre las muestras colectadas en Córdoba, Sucre, Atlántico,Valle del Cauca y Cundinamarca, las cuales se clasificaron casi en su totalidad como biotipo B, en comparación al biotipo A usado como testigo y procedente de una colonia de cría mantenida en laboratorio por más de 10 años. Se encontró alto grado de polimorfismo dentro del biotipo B, el cual predominó en las zonas muestreadas atacando 23 especies cultivadas y 11 especies de malezas. La similitud en cuanto a a/B esterasas entre los dos biotipos fue apenas de 20%. A nivel molecular se encontraron diferencias entre los productos amplificados mediante RAPD con los cebadores OPA-04, OPA-11 y OPA-17. Además, luego de criar los biotipos sobre cuatro especies de cucurbitáceas, se observó el desarrollo de hojas plateadas en Cucurbita moschata (Duchesne), síntoma causado únicamente por ninfas del biotipo B, transcurridos 21 días después de la infestación. El biotipo B mostró una mayor agresividad al lograr desarrollarse 23 a 33% más rápido en C. mixta Pang., C. pepo L., C. ficifolia Bouché y C. moschata que el biotipo A.