Spodoptera frugiperda (J.E. Smith) es un insecto lepidóptero considerado en Colombia, como plaga en una gran variedad de cultivos de interés como algodón, arroz, maíz y sorgo, entre otros. Su amplio rango de distribución en el continente americano ha llevado al desarrollo de diversos estudios relacionados con el control biológico de la plaga, identificando de esta forma enemigos naturales de diversa índole. En el presente trabajo se evalúa la actividad biopesticida de aislamientos nativos de Beauveria spp. y Metarhizium spp. contra larvas de segundo ínstar de S. frugiperda con el objeto de determinar el potencial biocontrolador de estos hongos entomopatógenos como alternativa de manejo de la plaga. Una gran variabilidad en cuanto a actividad bioinsecticida fue observada al evaluar 30 aislamientos fúngicos provenientes de diferentes hospederos y sitios geográficos. De lo. 30 aislamientos, únicamente 18 lograron ser reactivados sobre larvas del insecto blanco, los cuales pasaron a la primera fase de evaluación de actividad insecticida, empleando una concentración de 1 x 108 conidias.ml-1. En esta fase la mortalidad varió entre 0 y 93%, encontrándose 7 aislamientos que superaron el 50% de mortalidad, los cuales presentaron un TL50, entre 1.41 y 6.31 días. En la segunda fase de evaluación, se estimó la CL50, por el modelo Probit, a los aislamientos que presentaron el TL50 más bajo, encontrando valores entre 8.2 x 106 - 1.1 x 108 conidlas.ml-1. Los aislamientos IBUN 59, IBUN 76 e IBUN 146, pertenecientes al género Beauveria, presentaron los porcentajes de mortalidad más altos, los valores de TL50 y CL50 más bajos y fueron altamente estables en cuanto a su actividad bioinsecticida, a lo largo de las diferentes fases de evaluación, por lo cual se sugieren pruebas de campo con estos aislamientos.