ImpactU Versión 3.11.2 Última actualización: Interfaz de Usuario: 16/10/2025 Base de Datos: 29/08/2025 Hecho en Colombia
Avances en la identificación y caracterización de los factores moleculares relacionados con la resistencia de Phaseolus lunatus a Acanthoscelides obtectus (Coleoptera : Bruchidae)
Para desarrollar líneas de fríjol mejoradas con resistencia a Acanthoscelides obtectus (S ay), plaga importante del grano almacenado, es indispensable identificar los genes involucrados en la resistencia antibiótica. La técnica de visualización diferencial del ácido ribonucleico (ARN) constituye una herramienta útil para el aislamiento de genes que muestran expresión diferencial en varios tejidos. Hasta el momento se ha implementado la visualización diferencial radioactiva y no radioactiva, aislándose el ARN total de los genotipos de Phaseolus lunatus L. con expresión diferencial de resistencia a A. obtectus, para formar dos grupos de materiales resistentes y susceptibles. El ARN mensajero (secuencia codificante de proteínas) fue purificado por cromatografía antes de utilizarlo en los experimentos de transcripción reversa. La síntesis de la primera cadena se realizó con hexanucleótido y mediante la reacción en cadena de la polimerasa (RCP) se aumentó el número de los fragmentos de ADN copia (ADNc) utilizando cebadores de diez nucle ótidos. La confirmación de las bandas aisladas se determinó mediante la visualización diferencial del ARN total de cada uno de los genotipos. En la evaluación de 76 decanucleótidos al azar, se evidenciaron seis bandas diferenciales con tamaños que oscilaron entre 200 y 600 pb. Las bandas purificadas y amplificadas fueron evaluadas con genotipos resistentes y susceptibles mediante la técnica de "northern blot". Las bandas presentes en los genotipos resistentes fueron reamplificadas y donadas en el plásmido pCRII. Simultáneamente se desarrollaron investigaciones para esclarecer el factor de la resistencia a A. obtectus mediante la hibridización subtractiva y la utilización de cebadores degenerados.