Escobedia grandiflora (L.f) Kuntze es una planta hemiparásita, cuya propagación presenta dificultades. Este trabajo se planteó: (1) Determinar el protocolo de desinfección de las semillas, (2) evaluar su germinación con la aplicación de Ácido 3-indol Acético (AIA), y Ácido Giberélico (AG3), y (3) evaluar el desarrollo de plántulas in vitro en dos tipos de gelificante y a diferentes concentraciones de AIA. Mediante esta investigación se encontró que la desinfección de semilla fue mejor en hipoclorito de sodio durante 90 segundos, ya que presentó 0% de contaminación y 100% de germinación. Adicionalmente se obtuvo una mejor germinación sin el uso de hormonas. Por otro lado, el gelificante Phytagel favoreció el mayor crecimiento de plántulas. En cuanto la concentración de AIA, se obtuvo una mayor longitud de la raíz sin la aplicación del AIA, sin embargo, la longitud total de la plántula fue mejor con 1,0 mg/l de AIA. Se concluye que es posible la obtención de vitroplantas de E. grandiflora a partir de semilla, sin adición de las hormonas AIA y AG3 en las concentraciones evaluadas, sin embargo, es importante evaluar otras concentraciones y otras hormonas para acortar el tiempo de las plántulas en condiciones in vitro.